Prueba molecular diferente de PCR para la enfermedad de la Cardiopatía Isquémica

• Técnica de secuenciación

Técnica molecular en el secuenciador ABI Prism (Applied Biosystems)

El secuenciador automático ABI Prism 377 es un sistema de electroforesis y detección de fluorescencia, controlado por microprocesador, que se utiliza para secuencia automática o análisis de fragmentos de ADN empleando el método de secuenciación automática en geles desnaturalizantes. Unos de los genes que han sido estudiados por esta técnica molecular, ha sido; "gen codificante de leucotrienos. Para su genotipado se obtiene y purifica el ADN genómico de sangre total con anticuagulante EDTA  de cada paciente. La concentración de ADN se determina por espectrofotometría ultravioleta. A continuación se utilizan las sondas TaqMan para la reconstrucción del gen. Se utiliza el SNPS (single nucleotide polymorphisms) que será escaneado por el secuenciador. Los datos del genotipo se analizarán usando el programa PHASE v2.0.2.

                                                Secuendciador ABI Prisms                                                                     Secuenciación de Sanger

Referencia

• Aránzazu M. Estudio de marcadores bioquímicos de interés en el diagnóstico y pronóstico del síndrome coronario agudo. Universidad Complutense de Madrid: Departamento de Bioquímica y Biología Molecular [internet].2010. [citado 24 de mayo de 2019]. Disponible en: https://eprints.ucm.es/10752/1/T31857.pdf